Chemische Verbindungen, die als 2610044O15Rik-Aktivatoren identifiziert wurden, sind eine eigene Klasse, die die Expression des 2610044O15Rik-Gens in einer zellulären Umgebung verstärken können. Der Entdeckungsprozess für diese Aktivatoren umfasst in der Regel ein Hochdurchsatz-Screening-Protokoll (HTS), eine effiziente Methode, um große Bibliotheken chemischer Substanzen zu durchsuchen und diejenigen mit spezifischer biologischer Aktivität zu finden. Der Eckpfeiler dieser Screening-Technik ist ein Reportergen-Assay, der auf die Aktivierung des Promotors des Gens 2610044O15Rik reagiert. Dieses Assay-System integriert ein Reportergen, das einen fluoreszierenden oder chemilumineszenten Marker kodieren könnte, unter die regulatorische Sequenz des Gens 2610044O15Rik. Die Aktivierung des Promotors durch eine chemische Verbindung führt zur Expression des Reporters, und dieses Ereignis wird durch ein messbares Signal angezeigt. Sobald potenzielle 2610044O15Rik-Aktivatoren durch HTS identifiziert wurden, werden sie einer strengen Validierung unterzogen, um ihre genaktivierenden Fähigkeiten zu bestätigen. Eine entscheidende Methode in diesem Validierungsprozess ist die quantitative Polymerase-Kettenreaktion (qPCR), die die mRNA-Expression des 2610044O15Rik-Gens nach der Anwendung der Verbindung quantifiziert. Ein Anstieg der mRNA-Spiegel im Vergleich zu unbehandelten Kontrollen würde darauf hinweisen, dass die Verbindung tatsächlich die Genexpression auf transkriptioneller Ebene stimulieren kann. Um festzustellen, ob diese Hochregulierung auf mRNA-Ebene zu einer Zunahme des vom Gen kodierten Proteins führt, wird eine Western-Blot-Analyse durchgeführt. Bei diesem Verfahren werden Proteine durch Gelelektrophorese getrennt, anschließend auf eine Membran übertragen und mit spezifischen Antikörpern gegen das Zielprotein 2610044O15Rik nachgewiesen. Eine Verbindung, die im Vergleich zu Kontrollgruppen durchgängig die Fähigkeit zeigt, sowohl die mRNA- als auch die Proteinspiegel zu erhöhen, wird als Aktivator bestätigt.
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Produkt | CAS # | Katalog # | Menge | Preis | Referenzen | Bewertung |
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8-Bromoadenosine 3′,5′-cyclic monophosphate | 23583-48-4 | sc-217493B sc-217493 sc-217493A sc-217493C sc-217493D | 25 mg 50 mg 100 mg 250 mg 500 mg | $106.00 $166.00 $289.00 $550.00 $819.00 | 2 | |
8-Br-cAMP dient als cAMP-Analogon, das PKA aktiviert. Nach der PKA-Aktivierung wird angenommen, dass RAI1 phosphoryliert wird, was seine Stabilität und Transkriptionsaktivität erhöhen und damit seine funktionelle Aktivität steigern könnte. | ||||||
Rolipram | 61413-54-5 | sc-3563 sc-3563A | 5 mg 50 mg | $75.00 $212.00 | 18 | |
Rolipram hemmt Phosphodiesterase 4, was zu erhöhten cAMP-Spiegeln führt. Dies wiederum aktiviert PKA, was möglicherweise die Phosphorylierung und Aktivierung von RAI1 erleichtert und seine Rolle bei der Transkriptionsregulation verstärkt. | ||||||
IBMX | 28822-58-4 | sc-201188 sc-201188B sc-201188A | 200 mg 500 mg 1 g | $159.00 $315.00 $598.00 | 34 | |
IBMX ist ein nicht selektiver Inhibitor von Phosphodiesterasen, der die intrazellulären cAMP-Spiegel erhöht, wodurch PKA aktiviert wird. Aktivierte PKA ist dann in der Lage, RAI1 zu phosphorylieren und so seine transkriptionellen regulatorischen Funktionen zu verstärken. | ||||||
Adenosine 3′,5′-cyclic monophosphate | 60-92-4 | sc-217584 sc-217584A sc-217584B sc-217584C sc-217584D sc-217584E | 100 mg 250 mg 5 g 10 g 25 g 50 g | $114.00 $175.00 $260.00 $362.00 $617.00 $1127.00 | ||
Db-cAMP ist ein zellpermeables cAMP-Analogon, das PKA aktiviert. Diese Aktivierung könnte zur Phosphorylierung von RAI1 führen, wodurch seine transkriptionelle regulatorische Aktivität verstärkt und seine funktionelle Rolle bei der Genexpression erhöht wird. | ||||||
A23187 | 52665-69-7 | sc-3591 sc-3591B sc-3591A sc-3591C | 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg | $54.00 $128.00 $199.00 $311.00 | 23 | |
A23187 erhöht den intrazellulären Kalziumspiegel, wodurch kalziumabhängige Proteinkinasen aktiviert werden können. Diese Kinasen könnten RAI1 phosphorylieren und so möglicherweise seine funktionelle Rolle bei der transkriptionellen Regulation verstärken. | ||||||
Ionomycin | 56092-82-1 | sc-3592 sc-3592A | 1 mg 5 mg | $76.00 $265.00 | 80 | |
Ionomycin ist ein weiterer Kalziumionophor, der die intrazelluläre Kalziumkonzentration erhöht und dadurch Kalzium-abhängige Kinasen aktiviert, die die Aktivität von RAI1 durch Phosphorylierungsmechanismen verstärken können. | ||||||
Cilostazol | 73963-72-1 | sc-201182 sc-201182A | 10 mg 50 mg | $107.00 $316.00 | 3 | |
Cilostazol hemmt die Phosphodiesterase Typ 3 und erhöht die cAMP-Konzentrationen. Der Anstieg von cAMP aktiviert PKA, was zu einer verstärkten Phosphorylierung und Aktivität von RAI1 in seiner Rolle bei der Genregulation führen könnte. |