8430426H19Rik Activateurs

Les activateurs 8430426H19Rik courants comprennent, entre autres, la forskoline CAS 66575-29-9, l'ionomycine CAS 56092-82-1, le PMA CAS 16561-29-8, l'acide rétinoïque, tous trans CAS 302-79-4 et l'adénosine 3',5'-cyclique monophosphate CAS 60-92-4.

Les activateurs du gène 8430426H19Rik sont une classification chimique attribuée aux composés qui augmentent l'expression du gène 8430426H19Rik. La découverte et la validation de ces activateurs impliquent une approche expérimentale à deux volets. Dans un premier temps, le criblage à haut débit (HTS) est utilisé pour passer au crible de vastes chimiothèques à la recherche de composés actifs. Cette technique utilise un test de gène rapporteur, une méthode dans laquelle un gène rapporteur, capable d'émettre un signal détectable tel que la fluorescence ou la luminescence, est placé sous le contrôle du promoteur du gène 8430426H19Rik. Lorsque des cellules contenant ce gène rapporteur interagissent avec divers composés chimiques, les composés susceptibles d'activer le promoteur entraînent une augmentation du signal du rapporteur. Cette amplification du signal sert d'indicateur de la capacité du composé à renforcer l'expression du gène.

L'étape suivante consiste à utiliser la PCR quantitative (qPCR) pour quantifier avec précision la quantité d'ARNm 8430426H19Rik dans les cellules. Une augmentation des niveaux d'ARNm détectée par qPCR indiquerait que les composés peuvent effectivement stimuler la transcription du gène. Cependant, pour s'assurer que l'augmentation de l'ARNm se traduit par une augmentation correspondante des niveaux de protéines, une analyse par Western blot est utilisée. La présence d'une bande protéique plus prononcée, par rapport aux échantillons de contrôle, confirme que le composé a la capacité d'influencer le gène non seulement au niveau de la transcription, mais aussi au niveau de la traduction, ce qui aboutit à une augmentation de la protéine réelle.