mGBP8 Aktivatoren

Gängige mGBP8 Activators sind unter underem Forskolin CAS 66575-29-9, (-)-Epigallocatechin Gallate CAS 989-51-5, PMA CAS 16561-29-8, LY 294002 CAS 154447-36-6 und D-erythro-Sphingosine-1-phosphate CAS 26993-30-6.

Die erste Entdeckung solcher Aktivatoren würde wahrscheinlich mit der Entwicklung eines biochemischen Tests zur Messung der GTPase-Aktivität von mGBP8 beginnen. Dieser Assay könnte auf der Fähigkeit des Proteins basieren, GTP zu GDP zu hydrolysieren, eine Reaktion, die mit verschiedenen Techniken überwacht werden kann, wie z. B. der Freisetzung von anorganischem Phosphat oder der Verwendung von fluoreszenzmarkierten GTP-Analoga. Das Hochdurchsatz-Screening (HTS) chemischer Bibliotheken unter Verwendung dieser Assays würde darauf abzielen, Verbindungen zu identifizieren, die die GTP-Hydrolyserate erhöhen, was auf eine verstärkte mGBP8-Aktivität hinweist. Treffer aus dem HTS würden als mGBP8-Aktivierungskandidaten gelten und einer weiteren Validierung unterzogen werden, um ihre spezifische Aktivität zu bestätigen.

Sobald die Aktivierungskandidaten identifiziert sind, umfasst die sekundäre Validierung eine genauere Untersuchung der Wechselwirkung zwischen diesen Molekülen und mGBP8. Techniken wie die isothermische Titrationskalorimetrie (ITC) würden Daten über die Thermodynamik der Bindungsinteraktion liefern, während die Oberflächenplasmonenresonanz (SPR) Aufschluss über die Kinetik der Bindung des Aktivators an mGBP8 geben würde. Diese Methoden würden dazu beitragen, zu bestätigen, ob die beobachtete Aktivitätssteigerung auf eine direkte Wirkung des Aktivators auf mGBP8 zurückzuführen ist. Weitere Studien, einschließlich Röntgenkristallographie oder Kryo-Elektronenmikroskopie (Kryo-EM), könnten eine detaillierte dreidimensionale Struktur von mGBP8 im Komplex mit dem Aktivator liefern und die molekulare Grundlage für die Aktivierung erhellen.