当一种化合物成功激活启动子时,它会诱导报告基因的表达,从而产生可观察到的信号。该信号的强度与启动子的激活水平相关,并间接反映该化合物作为激活剂的效力。随后,我们将对那些能够显著增强报告基因信号的化合物进行更详细的评估。筛选过程对于分离能够有效调节基因表达的化学物质至关重要,为下一步的定性研究提供了起点。在最初的HTS阶段之后,推定的2610003J06Rik激活剂将接受一系列验证测试,以确认其基因激活特性。定量聚合酶链反应(qPCR)是这一阶段使用的主要技术之一。它用于量化化合物相互作用后2610003J06Rik基因的mRNA水平,mRNA水平升高表明化合物可以在转录水平上调基因表达。作为qPCR的补充,还进行了蛋白质印迹分析,以确定观察到的mRNA水平升高是否转化为基因编码的蛋白质的增加。该技术包括通过凝胶电泳分离蛋白质,将其转移到膜上,然后用靶蛋白特异性抗体进行检测。qPCR和Western blot这些验证步骤在表征过程中必不可少,因为它们共同确保化合物不仅增加2610003J06Rik基因的转录,而且导致蛋白质合成的相应增加。这种多层次的方法确保化合物作为激活剂的作用在基因表达调节的不同层面得到充分证实。
関連項目
产品名称 | CAS # | 产品编号 | 数量 | 价格 | 应用 | 排名 |
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IBMX | 28822-58-4 | sc-201188 sc-201188B sc-201188A | 200 mg 500 mg 1 g | $159.00 $315.00 $598.00 | 34 | |
IBMX是一种非特异性磷酸二酯酶抑制剂,可增加cAMP和cGMP水平。这可以增强PKA和PKG途径,从而通过磷酸化反应增强2610003J06Rik的活性。 | ||||||
PMA | 16561-29-8 | sc-3576 sc-3576A sc-3576B sc-3576C sc-3576D | 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg 100 mg | $40.00 $129.00 $210.00 $490.00 $929.00 | 119 | |
PMA是一种PKC激活剂,可通过激活蛋白激酶C来增强2610003J06Rik的活性,从而影响与2610003J06Rik功能相关的信号通路或结构元素。 | ||||||
A23187 | 52665-69-7 | sc-3591 sc-3591B sc-3591A sc-3591C | 1 mg 5 mg 10 mg 25 mg | $54.00 $128.00 $199.00 $311.00 | 23 | |
A23187是一种钙离子载体,可增加细胞内钙离子浓度,通过钙离子依赖性信号通路增强2610003J06Rik的活性,从而影响蛋白质的功能。 | ||||||
Ionomycin | 56092-82-1 | sc-3592 sc-3592A | 1 mg 5 mg | $76.00 $265.00 | 80 | |
异诺霉素与 A23187 类似,是一种钙离子诱导剂,能提高细胞内钙离子浓度,激活钙依赖性激酶,从而激活 2610003J06Rik。 | ||||||
(−)-Epigallocatechin Gallate | 989-51-5 | sc-200802 sc-200802A sc-200802B sc-200802C sc-200802D sc-200802E | 10 mg 50 mg 100 mg 500 mg 1 g 10 g | $42.00 $72.00 $124.00 $238.00 $520.00 $1234.00 | 11 | |
已知 EGCG 可抑制某些类型的蛋白激酶,通过减少竞争性或负性调节信号,有可能改变信号通路,从而有利于 2610003J06Rik 的激活。 | ||||||
LY 294002 | 154447-36-6 | sc-201426 sc-201426A | 5 mg 25 mg | $121.00 $392.00 | 148 | |
LY294002 是一种 PI3K 抑制剂,可以调节 PI3K/Akt 通路,有可能解除对 2610003J06Rik 所处通路的抑制控制,从而增强其活性。 | ||||||
SB 203580 | 152121-47-6 | sc-3533 sc-3533A | 1 mg 5 mg | $88.00 $342.00 | 284 | |
SB203580是一种p38 MAPK抑制剂,可通过抑制竞争性应激反应途径,将细胞信号传导的平衡转移到间接增强2610003J06Rik活性的途径。 | ||||||
Spermine | 71-44-3 | sc-212953A sc-212953 sc-212953B sc-212953C | 1 g 5 g 25 g 100 g | $60.00 $192.00 $272.00 $883.00 | 1 | |
精胺是一种多胺,可调节离子通道功能,并可能影响调节 2610003J06Rik 或与其相互作用的信号通路,从而导致其活性增强。 | ||||||
Zaprinast (M&B 22948) | 37762-06-4 | sc-201206 sc-201206A | 25 mg 100 mg | $103.00 $245.00 | 8 | |
扎普瑞纳特可抑制磷酸二酯酶,尤其是 PDE5,从而导致 cGMP 水平升高,这可能会通过 cGMP 依赖性蛋白激酶的激活来增强 2610003J06Rik 的活性。 | ||||||
Y-27632, free base | 146986-50-7 | sc-3536 sc-3536A | 5 mg 50 mg | $182.00 $693.00 | 88 | |
Y-27632 是一种 ROCK 抑制剂,可导致细胞骨架动力学和细胞运动途径发生变化,如果 2610003J06Rik 参与了这些过程,就有可能增强其活性。 |