XTP3TPA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407430

Visão geral

DCTPP1 codifica a XTP3TPA, uma pirofosfatase citosólica de dCTP que hidrolisa desoxinucleósidos trifosfato não canônicos para ajudar a manter equilibrados os pools de dNTPs e o controle de qualidade de nucleotídeos. Ao limitar a incorporação de nucleotídeos aberrantes no DNA, a XTP3TPA sustenta a estabilidade do genoma, a fidelidade da replicação e a coordenação entre o reparo do DNA e as respostas ao estresse replicativo. Alterações no metabolismo de nucleotídeos e desequilíbrios nos pools de dNTPs são características comuns de estados proliferativos e da biologia tumoral, tornando o DCTPP1 um nó útil para estudar as ligações entre a “sanitização” de nucleotídeos, o dano oxidativo e a mutagênese. A investigação funcional de DCTPP1 pode elucidar mecanismos que conectam a reprogramação metabólica à sinalização de dano ao DNA e ao controle do ciclo celular em células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO XTP3TPA (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DCTPP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DCTPP1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DCTPP1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína XTP3TPA.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DCTPP1 para a investigação da sinalização de XTP3TPA, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DCTPP1 críticos para a função XTP3TPA
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DCTPP1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo XTP3TPA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo XTP3TPA Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DCTPP1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo XTP3TPA Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR XTP3TPA (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DCTPP1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DCTPP1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.