Tuba Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406569
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Tuba O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Tuba, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Tuba Anticorpo (MH-8): sc-135592
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Tuba Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406569 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DNMBP codifica a Tuba, um fator de troca de nucleotídeos de guanina (GEF) para Rho, multidomínios, que conecta a sinalização de membrana à remodelação do citoesqueleto de actina e microtúbulos. Por meio da ativação de pequenas GTPases como a CDC42 e da coordenação com complexos endocíticos e juncionais, a Tuba ajuda a regular a polaridade celular, o tráfego vesicular e a remodelação das junções aderentes e das junções estreitas. Essas funções inserem o DNMBP em vias que controlam a organização epitelial, o crescimento de neuritos e a morfogênese dependente de migração. A desregulação da sinalização do citoesqueleto e de redes de polaridade envolvendo a Tuba tem sido implicada em contextos de invasão celular aberrante e fenótipos do neurodesenvolvimento, reforçando seu valor em estudos mecanísticos da arquitetura celular relevante para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Tuba (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DNMBP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DNMBP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DNMBP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Tuba.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DNMBP para a investigação da sinalização de Tuba, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DNMBP críticos para a função Tuba
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DNMBP para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Tuba Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Tuba Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DNMBP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Tuba Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Tuba (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DNMBP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DNMBP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.