TIP30 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406742

Panoramica

HTATIP2 codifica TIP30 (nota anche come CC3), una proteina citoplasmatica e nucleare coinvolta nella regolazione di programmi trascrizionali e dell’omeostasi cellulare. TIP30 è stata associata al controllo dell’apoptosi, alla modulazione del trasporto nucleo‑citoplasmatico e alla regolazione delle vie di traffico endocitico che influenzano il turnover dei recettori e la segnalazione dei fattori di crescita. Alterazioni dell’espressione di HTATIP2/TIP30 sono state riportate in diversi contesti tumorali e sono studiate per la loro associazione con proliferazione cellulare, invasione e fenotipi metastatici. Queste proprietà rendono TIP30 un bersaglio utile per analizzare le reti di segnalazione che collegano risposte allo stress, traffico intracellulare e regolazione genica nelle cellule umane.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TIP30 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene HTATIP2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del HTATIP2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto HTATIP2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TIP30.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di HTATIP2 per lo studio della segnalazione di TIP30, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni HTATIP2 critici per la funzione di TIP30
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di HTATIP2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TIP30 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TIP30 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus HTATIP2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TIP30 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TIP30 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia HTATIP2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio HTATIP2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.