Tenascin-R Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423465

Descripción general

Tnr codifica Tenascina-R, una glicoproteína de la matriz extracelular enriquecida en el sistema nervioso central que modula las interacciones célula–célula y célula–matriz durante el desarrollo neural y la maduración de los circuitos. La Tenascina-R contribuye al crecimiento de neuritas, la guía axonal, la estabilización sináptica y la mielinización, en parte mediante interacciones con moléculas de adhesión y proteoglicanos que conforman la red perineuronal. Al influir en la señalización extracelular y la plasticidad estructural, afecta procesos como la conectividad neuronal y la remodelación dependiente de la actividad. La función o la expresión alteradas de Tenascina-R se han asociado con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que la hace relevante para estudiar los mecanismos subyacentes a la organización sináptica y la excitabilidad de redes en modelos murinos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Tenascin-R (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Tnr en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Tnr junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Tnr tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Tenascin-R.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Tnr para la investigación de la señalización de Tenascin-R, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Tnr críticos para la función de Tenascin-R
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Tnr para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Tenascin-R CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Tenascin-R CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Tnr. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Tenascin-R (m) y el plásmido HDR Tenascin-R (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Tnr para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Tnr definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.