Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TECK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422841
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TECK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TECK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TECK Anticorpo (YY05): sc-80344
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TECK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422841 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ccl25 codifica a quimiocina expressa no timo (TECK), uma quimiocina CC que sinaliza principalmente por meio do CCR9 para direcionar a migração quimiotática e o posicionamento de leucócitos CCR9+. Em camundongos, a TECK contribui para o tráfego de células imunes em microambientes tímicos e em tecidos mucosos, moldando o homing de linfócitos, a vigilância tecidual e a organização imune regional. A sinalização a jusante envolve vias dependentes de GPCR, incluindo PI3K/AKT e cascatas de MAPK, que regulam motilidade, adesão e remodelamento do citoesqueleto. A atividade desregulada do eixo Ccl25–CCR9 tem sido implicada na infiltração imune inflamatória e na localização alterada de linfócitos, com relevância para a inflamação de mucosas e para modelos de distribuição de células imunes associada a tumores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TECK (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ccl25 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ccl25, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ccl25 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TECK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ccl25 para a investigação da sinalização de TECK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ccl25 críticos para a função TECK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ccl25 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TECK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TECK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ccl25. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TECK Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TECK (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ccl25 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ccl25 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.