TAL2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406836

Panoramica

TAL2 (T-cell acute lymphocytic leukemia 2) codifica un fattore di trascrizione basic helix–loop–helix (bHLH) che contribuisce alla specificazione di linea e alla regolazione dei programmi di espressione genica durante lo sviluppo ematopoietico. TAL2 può partecipare a complessi trascrizionali che influenzano l’accessibilità della cromatina e coordinano le decisioni tra differenziamento e proliferazione, intersecandosi con reti regolatorie più ampie guidate da fattori bHLH. L’espressione deregolata di TAL2 è stata associata a un controllo trascrizionale anomalo in contesti della linea T ed è studiata in modelli di leucemogenesi e di sviluppo alterato delle cellule immunitarie. In quanto proteina regolatoria nucleare, TAL2 rappresenta un punto di accesso gestibile per analizzare i circuiti trascrizionali, le transizioni di destino cellulare e le dipendenze oncogeniche dai fattori di trascrizione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO TAL2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene TAL2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del TAL2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto TAL2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina TAL2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di TAL2 per lo studio della segnalazione di TAL2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni TAL2 critici per la funzione di TAL2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di TAL2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal TAL2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal TAL2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus TAL2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal TAL2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR TAL2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia TAL2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio TAL2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.