TADA2B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406224

Übersicht

TADA2B (transkriptioneller Adapter 2B) ist eine zentrale Komponente des ATAC-Histonacetyltransferase-Komplexes, der die Initiation der Transkription unterstützt, indem er die Acetylierung von Histon H3 fördert und eine zugängliche Chromatinstruktur aufrechterhält. Über Interaktionen mit GCN5/KAT2A und verwandten Coaktivator-Modulen koppelt TADA2B Chromatin-Remodeling an RNA-Polymerase-II-abhängige Genexpressionsprogramme. Seine Aktivität steht mit der Regulation des Zellzyklusfortschritts, differenzierungsassoziierten Transkriptionsnetzwerken und der genomweiten Enhancer-Funktion in Verbindung. Eine veränderte Regulation von Komponenten der ATAC/GCN5-Achse, einschließlich TADA2B, wurde mit fehlregulierter Transkription und epigenetischen Zuständen in Zusammenhang gebracht, wie sie in Studien zu Krebs und neuroentwicklungsrelevanten Fragestellungen beobachtet werden.

Das TADA2B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TADA2B-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TADA2B-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TADA2B nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TADA2B-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TADA2B-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TADA2B-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TADA2B-Exone abzielen, die für die TADA2B-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TADA2B-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TADA2B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TADA2B CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TADA2B-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TADA2B HDR-Plasmid (h) und TADA2B HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TADA2B-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TADA2B-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.