Superoxide Dismutase 3/SOD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423071

Visão geral

O gene Sod3 de camundongo codifica a superóxido dismutase extracelular (SOD3), uma enzima secretada dependente de Cu/Zn que catalisa a dismutação do ânion superóxido em peróxido de hidrogênio e oxigênio, moldando assim a homeostase redox na matriz extracelular e na superfície celular. Ao limitar a modificação oxidativa de lipídios e proteínas e preservar a biodisponibilidade do óxido nítrico, a SOD3 influencia a sinalização vascular, o recrutamento de células inflamatórias e o remodelamento da matriz extracelular. Alterações na atividade da SOD3 estão associadas a fenótipos impulsionados por estresse oxidativo relevantes para a biologia cardiopulmonar e vascular, incluindo processos como disfunção endotelial, fibrose e inflamação crônica. Essas características fazem do Sod3 um ponto-chave para estudar o manejo extracelular de EROs (espécies reativas de oxigênio) e redes de sinalização reguladas por redox em modelos murinos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Superoxide Dismutase 3/SOD3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sod3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sod3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sod3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Superoxide Dismutase 3/SOD3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sod3 para a investigação da sinalização de Superoxide Dismutase 3/SOD3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sod3 críticos para a função Superoxide Dismutase 3/SOD3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sod3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Superoxide Dismutase 3/SOD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Superoxide Dismutase 3/SOD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sod3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Superoxide Dismutase 3/SOD3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Superoxide Dismutase 3/SOD3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sod3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sod3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.