Superoxide Dismutase 1/SOD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423069

Visão geral

Sod1 codifica a superóxido dismutase citosólica Cu/Zn SOD1, uma enzima antioxidante primária que converte o ânion superóxido em peróxido de hidrogênio e oxigênio, limitando o dano oxidativo. Ao modular a homeostase redox celular, a SOD1 influencia a função mitocondrial, o controle de qualidade de proteínas e vias de sinalização responsivas ao estresse, incluindo programas antioxidantes mediados por NRF2. A perturbação da atividade da SOD1 altera a suscetibilidade ao estresse oxidativo, à neuroinflamação e à proteotoxicidade, e a disfunção de SOD1 é amplamente utilizada como ponto de partida mecanístico para estudar a neurodegeneração e fenótipos relacionados de neurônios motores. Em sistemas murinos, Sod1 serve como um modelo manipulável para conectar o manejo de espécies reativas de oxigênio ao metabolismo, à lesão tecidual associada ao envelhecimento e à regulação transcricional sensível ao estado redox.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Superoxide Dismutase 1/SOD1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Sod1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Sod1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Sod1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Superoxide Dismutase 1/SOD1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Sod1 para a investigação da sinalização de Superoxide Dismutase 1/SOD1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Sod1 críticos para a função Superoxide Dismutase 1/SOD1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Sod1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Superoxide Dismutase 1/SOD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Superoxide Dismutase 1/SOD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Sod1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Superoxide Dismutase 1/SOD1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Superoxide Dismutase 1/SOD1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Sod1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Sod1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.