SSSCA1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406804

Descripción general

SSSCA1 (autoantígeno 1 del síndrome de Sjögren/esclerodermia) codifica una proteína nuclear conservada, identificada originalmente como autoantígeno en enfermedades autoinmunes sistémicas. Aunque sus funciones moleculares aún se están aclarando, la evidencia disponible vincula a SSSCA1 con la homeostasis nuclear, las interacciones proteína–proteína y procesos celulares sensibles al estrés que influyen en la regulación génica y el control del ciclo celular. Se han descrito alteraciones en la expresión o el reconocimiento inmunitario de SSSCA1 en contextos relevantes para la autoinmunidad y la biología del cáncer, lo que lo convierte en un objetivo útil para analizar mecanismos de regulación nuclear aberrante. El estudio de SSSCA1 facilita la investigación a nivel de vías sobre cómo las proteínas nucleares contribuyen a la patología asociada al sistema inmunitario y a programas de crecimiento desregulados.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO SSSCA1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen SSSCA1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del SSSCA1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de SSSCA1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína SSSCA1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en SSSCA1 para la investigación de la señalización de SSSCA1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de SSSCA1 críticos para la función de SSSCA1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de SSSCA1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido SSSCA1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido SSSCA1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus SSSCA1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR SSSCA1 (h) y el plásmido HDR SSSCA1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología SSSCA1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana SSSCA1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.