Sox-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406693
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Sox-8 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Sox-8, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Sox-8 Anticorpo (H-7): sc-374446
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Sox-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406693 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SOX8 codifica o fator de transcrição Sox-8, um membro da família SOX (SRY-related HMG-box) que se liga ao DNA por meio de um domínio HMG para regular a especificação de linhagens e programas de diferenciação. O Sox-8 participa de redes transcricionais que controlam derivados da crista neural, o desenvolvimento de células gliais e oligodendrócitos, e aspectos da biologia gonadal e esquelética, por meio de interações dependentes do contexto com cofatores e a cromatina. Ao modular programas de expressão gênica ligados a decisões de destino celular, proliferação e remodelamento da matriz extracelular, o SOX8 contribui para vias de desenvolvimento e para a homeostase tecidual. A expressão desregulada de SOX8 ou alterações na circuitaria da família SOX têm sido associadas a estados transcricionais oncogênicos e a anomalias do desenvolvimento, reforçando sua relevância em estudos mecanísticos da regulação gênica relacionada a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Sox-8 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SOX8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SOX8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SOX8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Sox-8.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SOX8 para a investigação da sinalização de Sox-8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SOX8 críticos para a função Sox-8
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SOX8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Sox-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Sox-8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SOX8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Sox-8 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Sox-8 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SOX8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SOX8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.