Sox-8 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406693

Übersicht

SOX8 kodiert den Transkriptionsfaktor Sox-8, ein Mitglied der SOX‑Familie (SRY-related HMG-box), das über eine HMG-Domäne an DNA bindet und so die Festlegung von Zelllinien sowie Differenzierungsprogramme reguliert. Sox-8 ist Teil transkriptioneller Netzwerke, die Derivate der Neuralleiste, die Entwicklung von Gliazellen und Oligodendrozyten sowie Aspekte der Gonaden- und Skelettbiologie steuern – über kontextabhängige Interaktionen mit Kofaktoren und Chromatin. Durch die Modulation von Genexpressionsprogrammen, die mit Zellschicksalsentscheidungen, Proliferation und Umbau der extrazellulären Matrix verknüpft sind, trägt SOX8 zu Entwicklungsprozessen und zur Gewebehomöostase bei. Eine fehlregulierte SOX8-Expression oder veränderte SOX‑Familien-Schaltkreise wurden mit onkogenen Transkriptionszuständen und Entwicklungsanomalien in Verbindung gebracht, was die Relevanz von SOX8 für mechanistische Studien zur krankheitsbezogenen Genregulation unterstreicht.

Das Sox-8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SOX8-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SOX8-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SOX8 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Sox-8-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SOX8-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Sox-8-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SOX8-Exone abzielen, die für die Sox-8-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SOX8-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Sox-8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Sox-8 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SOX8-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Sox-8 HDR-Plasmid (h) und Sox-8 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SOX8-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SOX8-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.