Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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SIRP-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401201
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- SIRP-α O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico SIRP-α, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:SIRP-α Anticorpo (C-7): sc-376884
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
SIRP-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401201 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A proteína reguladora de sinal alfa (SIRP-α), codificada pelo gene humano **SIRPA**, é um recetor transmembranar da superfamília das imunoglobulinas, expresso de forma proeminente em células mieloides, onde modula a ativação da imunidade inata. Por meio da fosforilação de motivos ITIM citoplasmáticos e do recrutamento das fosfatases SHP-1/SHP-2, a SIRP-α transmite sinalização inibitória a jusante do envolvimento do CD47, regulando a dinâmica do citoesqueleto, a fagocitose, a adesão e as respostas de citocinas. Este eixo CD47–SIRP-α molda o comportamento de macrófagos e células dendríticas em microambientes inflamatórios e tem sido implicado na evasão imunitária tumoral, na inflamação crónica e na desregulação da função mieloide. Por isso, o **SIRPA** é amplamente estudado em vias que controlam a homeostase imunitária, a função das células apresentadoras de antigénio e o reconhecimento célula–célula.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SIRP-α (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SIRPA em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SIRPA, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SIRPA na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SIRP-α.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SIRPA para a investigação da sinalização de SIRP-α, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SIRPA críticos para a função SIRP-α
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SIRPA para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo SIRP-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo SIRP-α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SIRPA. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo SIRP-α Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR SIRP-α (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SIRPA para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SIRPA definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.