Serglycin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422394
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Serglycin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Serglycin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Serglycin Anticorpo (C-11): sc-374657
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Serglycin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422394 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Srgn codifica a serglicina, um proteoglicano enriquecido em células hematopoéticas que atua como arcabouço para o empacotamento e o armazenamento de proteases, quimiocinas e outros mediadores bioativos dentro de grânulos secretórios. Em células imunes de camundongo, a serglicina contribui para a biogênese dos grânulos, a exocitose regulada e as interações com a matriz extracelular por meio de sua proteína central modificada por sulfato de condroitina. Essas funções conectam o Srgn a vias que controlam respostas efetoras imunes inatas e adaptativas, sinalização inflamatória e remodelamento dependente de proteases. Alterações na biologia da serglicina têm sido implicadas em ativação imune desregulada e em processos do microambiente associados a tumores, sustentando sua relevância em estudos mecanísticos de inflamação e biologia do câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Serglycin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Srgn em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Srgn, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Srgn na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Serglycin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Srgn para a investigação da sinalização de Serglycin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Srgn críticos para a função Serglycin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Srgn para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Serglycin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Serglycin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Srgn. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Serglycin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Serglycin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Srgn para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Srgn definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.