Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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RTEL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403196
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- RTEL1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico RTEL1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: RTEL1 Anticuerpo (H-5): sc-515427
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
RTEL1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403196 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
RTEL1 codifica la helicasa 1 reguladora de la elongación de los telómeros (Regulator of Telomere Elongation Helicase 1), una helicasa de ADN que preserva la estabilidad del genoma al favorecer una replicación y reparación del ADN fieles. RTEL1 desmantela estructuras secundarias aberrantes del ADN, como los G‑cuadruplex, y resuelve los bucles T (T-loops) teloméricos, lo que contribuye al mantenimiento de los telómeros y evita recombinaciones inapropiadas. Actúa en vías vinculadas al avance de la horquilla de replicación, al control de la recombinación homóloga y a la señalización de la respuesta al daño del ADN. La alteración de la actividad de RTEL1 se asocia con disfunción telomérica y fenotipos de inestabilidad genómica implicados en trastornos hereditarios de la biología de los telómeros y en la susceptibilidad al cáncer.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO RTEL1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RTEL1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RTEL1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RTEL1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RTEL1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RTEL1 para la investigación de la señalización de RTEL1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de RTEL1 críticos para la función de RTEL1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RTEL1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido RTEL1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RTEL1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RTEL1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RTEL1 (h) y el plásmido HDR RTEL1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RTEL1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RTEL1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.