REM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422645
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- REM O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico REM, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:REM Anticorpo (24E4): sc-58472
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
REM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422645 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Rem1 de camundongo codifica a REM, um membro da família RGK de pequenas proteínas ligantes de GTP, que modula a excitabilidade da membrana ao regular o tráfego e a abertura/fechamento (gating) de canais de Ca2+ dependentes de voltagem. Por meio de interações com subunidades β dos canais e reguladores do citoesqueleto, a REM influencia a sinalização dependente de Ca2+, o acoplamento excitação–contração e programas de transcrição dependentes de atividade. A expressão de Rem1 responde à estimulação celular e tem sido associada ao controle do crescimento e da diferenciação celular em tecidos eletricamente ativos, apoiando pesquisas em eletrofisiologia cardíaca, sinalização neuronal e função do músculo liso vascular. A desregulação da sinalização de RGK é investigada no contexto de mecanismos arritmogênicos, neuroadaptação e processos de remodelamento, nos quais a alteração do influxo de Ca2+ impacta vias a jusante.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO REM (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Rem1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Rem1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Rem1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína REM.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Rem1 para a investigação da sinalização de REM, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Rem1 críticos para a função REM
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Rem1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo REM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo REM Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Rem1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo REM Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR REM (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Rem1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Rem1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.