RBM45 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406889

Descripción general

RBM45 (proteína 45 con motivo de unión a ARN) es una proteína de unión a ARN conservada, implicada en la regulación génica postranscripcional mediante interacciones con el pre-ARNm y con complejos de procesamiento de ARN. Se la ha relacionado con el control del empalme (splicing) del ARN, la estabilidad de los transcritos y el ensamblaje de ribonucleoproteínas en respuesta al estrés, procesos que configuran los programas de expresión génica en neuronas y células gliales. RBM45 se estudia con frecuencia en el contexto de la neurodegeneración y la desregulación del metabolismo del ARN, incluida su asociación con la agregación patógena de proteínas y la alteración de la dinámica de los gránulos de ARN. Por lo tanto, la perturbación de la función de RBM45 puede utilizarse para investigar vías que conectan el procesamiento de ARN, las respuestas celulares al estrés y la proteostasis.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO RBM45 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RBM45 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RBM45 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RBM45 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína RBM45.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RBM45 para la investigación de la señalización de RBM45, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RBM45 críticos para la función de RBM45
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RBM45 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido RBM45 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido RBM45 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RBM45. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR RBM45 (h) y el plásmido HDR RBM45 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RBM45 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RBM45 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.