Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Rab GDI β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404136
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Rab GDI β O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Rab GDI β, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Rab GDI β Anticorpo (D-2): sc-515143
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Rab GDI β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404136 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GDI2 codifica o inibidor de dissociação de GDP da Rab beta (Rab GDI β), um regulador citosólico que se liga a GTPases Rab preniladas e controla seu ciclo entre as membranas e o citosol. Ao modular a localização das Rab e sua disponibilidade para ativação, a Rab GDI β ajuda a coordenar etapas de brotamento, ancoragem e fusão de vesículas, essenciais para o tráfego endocítico, vias de reciclagem e o transporte do Golgi para endossomos. A perturbação da função da Rab GDI β pode desorganizar a homeostase do tráfego de membranas, afetando a renovação de receptores, a compartimentalização da sinalização e a dinâmica de organelas. Alterações na expressão ou na regulação de Rab GDI2 têm sido investigadas no contexto de fenótipos celulares relevantes para a biologia do câncer e a neurobiologia, nas quais o transporte vesicular e a proteostase são críticos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Rab GDI β (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GDI2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GDI2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GDI2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Rab GDI β.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GDI2 para a investigação da sinalização de Rab GDI β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GDI2 críticos para a função Rab GDI β
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GDI2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Rab GDI β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Rab GDI β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GDI2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Rab GDI β Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Rab GDI β (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GDI2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GDI2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.