PTP22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-416917

Descripción general

PTPN22 codifica la fosfatasa tirosina citosólica PTP22 (también conocida como LYP), un regulador negativo clave de la señalización del receptor de antígeno en las células inmunitarias. Al desfosforilar intermediarios de señalización aguas abajo del receptor de células T y de vías relacionadas, PTP22 modula los umbrales de activación de los linfocitos, la producción de citocinas y la tolerancia inmunitaria. La variación genética y la actividad alterada de PTPN22 se asocian fuertemente con la susceptibilidad a múltiples enfermedades autoinmunes e inflamatorias, lo que lo convierte en un nodo ampliamente estudiado en las redes de señalización de los inmunorreceptores. Los estudios funcionales suelen vincular PTP22 con vías que controlan el equilibrio entre quinasas y fosfatasas proximales, programas transcripcionales dependientes de NFAT/NF-κB y la diferenciación de células inmunitarias.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PTP22 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PTPN22 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PTPN22 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PTPN22 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PTP22.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PTPN22 para la investigación de la señalización de PTP22, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PTPN22 críticos para la función de PTP22
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PTPN22 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PTP22 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PTP22 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PTPN22. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PTP22 (h) y el plásmido HDR PTP22 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PTPN22 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PTPN22 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.