PITHD1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-412754

개요

PITHD1은 26S 프로테아좀과의 상호작용을 통해 단백질 항상성(proteostasis)에 관여하는 것으로 알려진 작고 보존적인 단백질을 암호화하며, 조절된 단백질 분해 및 세포 스트레스 적응과 연관됩니다. 프로테아좀 관련 과정을 조절함으로써 PITHD1은 증식과 생존 표현형을 좌우하는 수명이 짧은 신호전달 및 세포주기 조절 인자들의 안정성에 영향을 줄 수 있습니다. 여러 종양 맥락에서 수행된 멀티오믹스 연구들에서 PITHD1의 발현 변화가 보고되어 왔으며, 이는 유비퀴틴–프로테아좀 시스템 의존성을 규명하기 위한 연구 표적으로서의 활용을 뒷받침합니다. 따라서 PITHD1의 기능을 규명하는 연구는 단백질 품질 관리, 스트레스 반응, 그리고 전사체/단백질체 리모델링을 조절하는 경로들과 관련성이 있습니다.

PITHD1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PITHD1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PITHD1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PITHD1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PITHD1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PITHD1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PITHD1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PITHD1 기능에 중요한 PITHD1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PITHD1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PITHD1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PITHD1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PITHD1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PITHD1 HDR 플라스미드 (h) 및 PITHD1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PITHD1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PITHD1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.