PIKE CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405344

개요

AGAP2는 PIKE를 암호화하는데, PIKE는 다중 도메인을 가진 GTPase이자 신호 어댑터로서 성장인자 수용체로부터의 입력을 포스포이노시티드 3-키나아제(PI3K) 신호와 연결함으로써, 증식·생존·세포골격 역학을 조절하는 PIP3 의존성 경로에 영향을 미칩니다. PIKE는 수용체 티로신 키나아제 신호전달 카스케이드의 구성요소들과 상호작용하고 AKT와 같은 하위 효과기를 조절하여, 여러 세포 유형에서 엔도사이토시스, 소포 수송, 액틴 리모델링에 영향을 줍니다. AGAP2/PIKE 활성이 조절 이상을 보이면 PI3K 중심 네트워크 배선의 교란을 통해 종양유발성 신호 변화, 대사 스트레스 반응, 침습적 표현형과 연관되는 것으로 알려져 있습니다. 이러한 특성 때문에 AGAP2는 인간 세포 모델에서 성장 및 생존 경로 내 신호 통합과 피드백 제어를 규명하는 데 유용한 노드가 됩니다.

PIKE CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 AGAP2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 AGAP2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 AGAP2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PIKE 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PIKE 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 AGAP2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PIKE 기능에 중요한 AGAP2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 AGAP2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PIKE CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PIKE CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 AGAP2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PIKE HDR 플라스미드 (h) 및 PIKE HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 AGAP2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 AGAP2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.