Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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p41-ARCb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419207
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p41-ARCb O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico p41-ARCb, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p41-ARCb Anticorpo (C-3): sc-137125
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p41-ARCb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419207 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Arpc1b codifica a p41-ARCb, uma subunidade regulatória do complexo Arp2/3 que nucleia redes ramificadas de actina, necessárias para a remodelação dinâmica do citoesqueleto. Em células de camundongo, a p41-ARCb sustenta processos como a formação de lamelipódios, a migração celular, a endocitose e as funções efetoras de células imunes, coordenando a polimerização de actina a jusante de GTPases da família Rho e de fatores promotores de nucleação. A montagem de actina dependente de Arp2/3 interage com vias de sinalização que controlam adesão, tráfego vesicular e a organização da sinapse imunológica. A atividade desregulada de ARPC1B/Arp2/3 está associada a defeitos no comportamento de células hematopoéticas e imunes e é relevante para o estudo, in vivo e in vitro, de fenótipos semelhantes à imunodeficiência e de mecanismos inflamatórios.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO p41-ARCb (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Arpc1b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Arpc1b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Arpc1b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína p41-ARCb.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Arpc1b para a investigação da sinalização de p41-ARCb, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Arpc1b críticos para a função p41-ARCb
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Arpc1b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo p41-ARCb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo p41-ARCb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Arpc1b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo p41-ARCb Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR p41-ARCb (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Arpc1b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Arpc1b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.