MSL3L1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-407378

Panoramica

MSL3 codifica MSL3L1, una proteina associata alla cromatina implicata nella regolazione epigenetica attraverso interazioni con i macchinari di acetilazione degli istoni e con complessi di controllo trascrizionale. MSL3L1 è collegata alla modulazione dell’accessibilità della cromatina e di programmi di espressione genica che influenzano la progressione del ciclo cellulare, la differenziazione e la stabilità del genoma. Come parte di reti più ampie di modificazioni istoniche, MSL3L1 favorisce una regolazione coordinata dell’output trascrizionale in risposta a segnali di sviluppo e ambientali. La deregolazione dei regolatori della cromatina in questa via è frequentemente associata a stati trascrizionali alterati osservati in ambito oncologico e nella ricerca sul neurosviluppo.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO MSL3L1 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene MSL3 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del MSL3 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto MSL3 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina MSL3L1.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di MSL3 per lo studio della segnalazione di MSL3L1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni MSL3 critici per la funzione di MSL3L1
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di MSL3 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal MSL3L1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal MSL3L1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus MSL3. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal MSL3L1 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR MSL3L1 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia MSL3 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio MSL3 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.