MOBP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421685

Descripción general

La proteína básica del oligodendrocito asociada a la mielina (MOBP), codificada por el gen Mobp del ratón, es un componente estructural abundante de la mielina del sistema nervioso central producido por oligodendrocitos maduros. MOBP contribuye a la compactación y estabilidad de la mielina y se estudia comúnmente en el contexto de la diferenciación de los oligodendrocitos, las interacciones axón–glía y el mantenimiento de la integridad de la sustancia blanca. La expresión de Mobp se asocia con programas de biogénesis de la mielina y con procesos de organización del citoesqueleto y de membranas que respaldan la formación de la vaina. Los niveles alterados de MOBP y la disrupción de la mielina son relevantes para los mecanismos de enfermedades desmielinizantes y neurodegenerativas, proporcionando un indicador de patología de la sustancia blanca en modelos experimentales.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MOBP (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Mobp en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Mobp junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Mobp tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MOBP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Mobp para la investigación de la señalización de MOBP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Mobp críticos para la función de MOBP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Mobp para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MOBP CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido MOBP CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Mobp. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MOBP (m) y el plásmido HDR MOBP (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Mobp para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Mobp definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.