MOB2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413424

Descripción general

MOB2 (activador de quinasas MOB 2) es una proteína adaptadora conservada que interactúa con las quinasas de la familia NDR/LATS para modular la señalización relacionada con Hippo, influyendo en cascadas de fosforilación que gobiernan la proliferación celular, la apoptosis y la organización del citoesqueleto. Mediante la regulación de la actividad de las quinasas y de la localización subcelular de los componentes de la vía, MOB2 contribuye al control de la progresión del ciclo celular, la polaridad y el crecimiento dependiente del contacto. La desregulación de la señalización Hippo/NDR se implica con frecuencia en fenotipos oncogénicos, y se ha asociado la alteración de la función de MOB2 con perturbaciones en redes supresoras de tumores y en el control proliferativo. Por ello, MOB2 es relevante para estudiar mecanismos que vinculan la regulación de quinasas con la homeostasis tisular y la reorganización de la señalización asociada a enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO MOB2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MOB2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MOB2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MOB2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MOB2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MOB2 para la investigación de la señalización de MOB2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MOB2 críticos para la función de MOB2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MOB2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido MOB2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido MOB2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MOB2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MOB2 (h) y el plásmido HDR MOB2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MOB2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MOB2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.