Matrilin-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404852

Visão geral

MATN2 codifica a matrilina-2, uma glicoproteína adaptadora da matriz extracelular (MEC), multidomínio, que participa da montagem e estabilização de redes filamentosas ao fazer a ponte entre colágenos, proteoglicanos e outros constituintes da matriz. A matrilina-2 sustenta a arquitetura tecidual e a comunicação célula–matriz, que influenciam a adesão, a migração e a mecanotransdução — processos intimamente ligados aos programas de remodelação da MEC. Por meio de suas funções na organização da matriz, MATN2 é relevante para estudos de biologia musculoesquelética e do tecido conjuntivo, bem como para contextos mais amplos em que a composição da MEC molda a inflamação e o reparo de feridas. A desregulação da homeostase da MEC envolvendo MATN2 tem sido associada à remodelação patológica e a fenótipos semelhantes à fibrose em múltiplos tecidos, motivando investigações mecanísticas em modelos de células humanas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Matrilin-2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MATN2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MATN2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MATN2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Matrilin-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MATN2 para a investigação da sinalização de Matrilin-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MATN2 críticos para a função Matrilin-2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MATN2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Matrilin-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Matrilin-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MATN2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Matrilin-2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Matrilin-2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MATN2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MATN2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.