KIF20A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403194

Visão geral

KIF20A (também conhecido como MKlp2) codifica uma proteína motora do tipo cinesina que se associa aos microtúbulos para coordenar a progressão mitótica, a montagem do fuso central e a citocinese. Ela sustenta a segregação cromossômica adequada e a formação do corpo médio por meio da regulação da dinâmica dos microtúbulos e de processos ligados ao checkpoint do fuso. A atividade de KIF20A conecta-se a vias de controle do ciclo celular que governam a transição G2/M e a saída da mitose, e sua desregulação é frequentemente investigada em contextos de proliferação aberrante e aneuploidia em doenças humanas. Como um motor associado à mitose, KIF20A é amplamente utilizada como um nó funcional para estudar remodelamento do citoesqueleto, posicionamento do plano de divisão e dependências de sinalização proliferativa em modelos de biologia do câncer.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KIF20A (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KIF20A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KIF20A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KIF20A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KIF20A.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KIF20A para a investigação da sinalização de KIF20A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KIF20A críticos para a função KIF20A
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KIF20A para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KIF20A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KIF20A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KIF20A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KIF20A Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KIF20A (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KIF20A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KIF20A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.