JunD CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-400713

Übersicht

JUND kodiert JunD, einen basischen Leucin-Zipper-Transkriptionsfaktor aus der AP-1-Familie, der mit JUN- und FOS-Proteinen dimerisiert, um die reizabhängige Genexpression zu regulieren. JunD integriert MAPK-Signale und entzündliche Stimuli, um über die transkriptionelle Modulation von Promotoren und Enhancern die Zellzyklusprogression, Differenzierung, Reaktionen auf oxidativen Stress und Apoptose zu steuern. Es trägt zu Chromatin- und Transkriptionsprogrammen stromabwärts von Zytokinen und Wachstumsfaktoren bei und beeinflusst Prozesse wie die Umgestaltung der extrazellulären Matrix und Immun-Signalgebung. Eine fehlregulierte AP-1-Aktivität unter Beteiligung von JunD wurde in mehreren Gewebekontexten mit veränderter Proliferation, Stressanpassung und tumorassoziierten Phänotypen in Verbindung gebracht, was seine Relevanz für mechanistische Krankheitsstudien unterstreicht.

Das JunD CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des JUND-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des JUND-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von JUND nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die JunD-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von JUND-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der JunD-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf JUND-Exone abzielen, die für die JunD-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere JUND-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom JunD CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom JunD CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des JUND-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das JunD HDR-Plasmid (h) und JunD HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von JUND-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten JUND-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.