Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ITM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405155
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- ITM1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico ITM1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ITM1 Anticuerpo (A-2): sc-390227
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
ITM1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405155 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
La STT3A humana codifica la subunidad catalítica del complejo oligosacariltransferasa (OST), que media la N‑glicosilación ligada a N cotraduccional en el retículo endoplásmico. Al transferir oligosacáridos preensamblados a residuos de asparagina en polipéptidos nacientes, STT3A contribuye al plegamiento de proteínas, al control de calidad y al tráfico intracelular, e influye en la degradación asociada al RE y en la proteostasis. La alteración de la glicosilación dependiente de STT3A puede interferir con la maduración de proteínas de membrana y secretadas, modificar la señalización de receptores e inmunitaria y activar la respuesta a proteínas mal plegadas. Las vías de N‑glicosilación desreguladas se han vinculado con trastornos congénitos de la glicosilación y con frecuencia se remodelan en el cáncer y otras enfermedades caracterizadas por estrés del RE y glicoproteomas de superficie celular alterados.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO ITM1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen STT3A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del STT3A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de STT3A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ITM1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en STT3A para la investigación de la señalización de ITM1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de STT3A críticos para la función de ITM1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de STT3A para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido ITM1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ITM1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus STT3A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ITM1 (h) y el plásmido HDR ITM1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología STT3A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana STT3A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.