IRF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437365
- alvos específicos: rat
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IRF-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (r) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IRF-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IRF-1 Anticorpo (E-4): sc-514544
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IRF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) | sc-437365 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O fator regulador de interferon 1 (IRF-1) é um fator de transcrição que se liga ao DNA e integra sinais de interferon, citocinas e detecção de patógenos para moldar programas gênicos da imunidade inata e adaptativa em células de rato. O IRF-1 regula redes transcricionais que controlam a apresentação de antígenos, a produção de mediadores inflamatórios e as respostas antivirais, fazendo interface com a sinalização JAK/STAT e com a comunicação cruzada com vias dependentes de NF-κB. Por meio de seus papéis no controle do ciclo celular e na apoptose, o IRF-1 influencia desfechos de resposta ao estresse e a diferenciação de células imunes. Alterações na atividade do IRF-1 têm sido associadas à inflamação desregulada e a fenótipos de defesa do hospedeiro, sustentando seu uso como um nó mecanístico em modelos de imunologia e infecção.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IRF-1 (r) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares rat. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IRF-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de IRF-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função IRF-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IRF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) e pelo IRF-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IRF-1 Plasmídeo HDR (r) e o Plasmídeo HDR IRF-1 (r2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.