Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401275

概要

ITGA1はインテグリンα1（CD49a）をコードしており、インテグリンβ1とヘテロ二量体を形成して、コラーゲンおよびラミニンに結合する受容体として機能し、細胞—細胞外マトリックス（ECM）接着とメカノトランスダクションを媒介します。フォーカルアドヒージョンの形成や、FAK/Src、PI3K–AKT、MAPK経路を介したシグナル伝達を通じて、インテグリンα1は状況依存的に細胞骨格の構築、遊走、増殖、生存に影響を及ぼします。ITGA1の活性は、接着ダイナミクスや下流の転写応答を形作ることにより、組織リモデリングおよび炎症細胞の局在調節にも寄与します。インテグリンα1/β1シグナルの変調は、線維化、腫瘍—間質クロストーク、免疫微小環境のリモデリングでみられる細胞—マトリックス相互作用の破綻と関連付けられており、経路に焦点を当てた研究の有用な標的となります。

Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるITGA1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ITGA1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ITGA1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Integrin α1/ITGA1/CD49aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Integrin α1/ITGA1/CD49aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ITGA1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Integrin α1/ITGA1/CD49aの機能に不可欠なITGA1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ITGA1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIntegrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ITGA1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Integrin α1/ITGA1/CD49a HDRプラスミド（h）および Integrin α1/ITGA1/CD49a HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはITGA1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のITGA1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。