IL-1F9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406176

Übersicht

IL36G kodiert Interleukin‑36‑Gamma (IL‑1F9), ein Zytokin aus der IL‑1‑Familie, das als von Epithel- und myeloiden Zellen stammendes Alarmin wirkt und angeborene sowie adaptive Immunantworten verstärkt. Nach proteolytischer Aktivierung signalisiert IL‑1F9 über den IL‑36‑Rezeptorkomplex (IL1RL2/IL1RAP) und aktiviert dadurch NF‑κB‑ und MAPK‑Signalwege. Dies führt zur Expression von Chemokinen und entzündlichen Mediatoren, die Leukozyten rekrutieren und aktivieren. Diese Achse trägt zur Barriereimmunität der Haut und mukosalen Oberflächen bei und prägt Th17‑assoziierte Entzündungen durch Crosstalk mit IL‑17/IL‑23‑Programmen. Eine fehlregulierte IL36G‑Aktivität wurde mit entzündlichen Hauterkrankungen wie Psoriasis sowie allgemeineren Formen chronischer Gewebeentzündung in Verbindung gebracht, was IL36G zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung der Verstärkung von Zytokin‑Netzwerken und der epithelialen Immun-Signalgebung macht.

Das IL-1F9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des IL36G-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des IL36G-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von IL36G nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IL-1F9-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von IL36G-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IL-1F9-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf IL36G-Exone abzielen, die für die IL-1F9-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere IL36G-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IL-1F9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom IL-1F9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des IL36G-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IL-1F9 HDR-Plasmid (h) und IL-1F9 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von IL36G-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten IL36G-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.