Heme Oxygenase 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420883

Visão geral

Hmox2 codifica a heme oxigenase 2 (HO-2), uma enzima associada ao retículo endoplasmático e expressa de forma constitutiva, que catalisa a degradação do heme em biliverdina, ferro livre e monóxido de carbono. Ao regular a disponibilidade celular de heme e gerar metabólitos redox-ativos, a HO-2 influencia respostas ao estresse oxidativo, a homeostase do ferro e a sinalização mediada por monóxido de carbono, que pode modular o tônus vascular e a atividade neuronal. Em tecidos de camundongo, Hmox2 é proeminente no sistema nervoso e contribui para a adaptação metabólica, a proteção contra citotoxicidade mediada por heme e a comunicação cruzada na sinalização inflamatória. A desregulação do turnover de heme e a alteração da atividade de HO-2 têm sido implicadas em modelos de neuroinflamação, estresse isquêmico e fisiologia cardiopulmonar, tornando Hmox2 um alvo útil para estudos em nível de vias sobre metabolismo do heme e sinalização de estresse.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Heme Oxygenase 2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hmox2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hmox2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hmox2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Heme Oxygenase 2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hmox2 para a investigação da sinalização de Heme Oxygenase 2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hmox2 críticos para a função Heme Oxygenase 2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hmox2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Heme Oxygenase 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Heme Oxygenase 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hmox2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Heme Oxygenase 2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Heme Oxygenase 2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hmox2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hmox2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.