Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Fucokinase Antibody (F-9): sc-377371. Western blot analysis of Fucokinase expression in MCF7 (A), NIH/3T3 (B) and Neuro-2A (C) whole cell lysates.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Fucokinase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-409449
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Fucokinase CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Fucokinase基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Fucokinase: sc-377371，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Fucokinase CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-409449 | 20 µg | $397.00 |
概述
人类 FUK 基因编码岩藻糖激酶（fucokinase），这是一种胞质激酶，在岩藻糖补救途径中将 L-岩藻糖磷酸化为岩藻糖-1-磷酸，从而为 GDP-岩藻糖生物合成提供底物。通过补充细胞内活化岩藻糖库，FUK 支持糖蛋白和糖脂的岩藻糖基化；这种修饰可调控受体信号传导、细胞—细胞黏附以及免疫识别。岩藻糖代谢及岩藻糖基化模式的改变与炎症失调、致癌信号以及肿瘤细胞侵袭性变化相关，因此 FUK 是研究糖链依赖性表型的重要节点。对 FUK 的功能性探究有助于将核苷酸糖通路的代谢通量与糖基转移酶产出，以及随后在膜蛋白与分泌型糖蛋白组中的变化联系起来。
Fucokinase CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中FUK基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对FUK基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏FUK开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Fucokinase蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建FUK缺失的细胞模型，用于Fucokinase信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Fucokinase 功能至关重要的 FUK 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 FUK 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Fucokinase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Fucokinase CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 FUK 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Fucokinase HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Fucokinase HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由FUK同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定FUK靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。