Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
FLJ23356 Antibody (S-23): sc-100433. Western blot analysis of FLJ23356 expression in non-transfected 293T: sc-117752 (A), human FLJ23356 transfected 293T: sc-372757 (B) and MDA-MB-231 (C) whole cell lysates.
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FLJ23356 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406964
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- FLJ23356 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在FLJ23356基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：FLJ23356: sc-100433，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
FLJ23356 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-406964 | 20 µg | $397.00 |
概述
POMK（蛋白质 O-甘露糖激酶），亦称 FLJ23356，编码一种定位于高尔基体的激酶，负责对 α-肌营养不良糖蛋白（α-dystroglycan）上的 O-甘露糖进行磷酸化，这是糖链成熟并支持细胞外基质结合的关键步骤。该活性处于 O-甘露糖基化及与肌营养不良糖蛋白病相关的糖基化网络中，并与调控基底膜组织、细胞黏附以及肌肉—脑组织完整性的通路交汇。POMK 依赖的糖基化一旦受损，会削弱 α-肌营养不良糖蛋白与配体的相互作用，并扰乱膜相关信号复合体。POMK 的遗传缺陷与肌营养不良糖蛋白病及先天性肌营养不良表型相关，因此它是建立糖基化相关疾病机制模型的一个有用基因位点。
FLJ23356 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中POMK基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对POMK基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏POMK开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使FLJ23356蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建POMK缺失的细胞模型，用于FLJ23356信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 FLJ23356 功能至关重要的 POMK 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 POMK 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 FLJ23356 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 FLJ23356 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 POMK 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 FLJ23356 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 FLJ23356 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由POMK同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定POMK靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。