F-Spondin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404101
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- F-Spondin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico F-Spondin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:F-Spondin Anticorpo (B-3): sc-390182
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
F-Spondin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404101 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
SPON1 codifica a F-spondina, uma glicoproteína secretada associada à matriz extracelular, enriquecida no sistema nervoso, que modula as interações célula–matriz, o crescimento de neuritos e a orientação axonal durante o desenvolvimento e a remodelação tecidual. A F-spondina pode influenciar a adesão e a migração ao ativar sinalização dependente de integrinas e proteoglicanos e ao moldar a organização da matriz extracelular. Ela tem sido associada à regulação da conectividade sináptica e da plasticidade neuronal, e foi relatada expressão alterada de SPON1 em contextos de neurodegeneração e de remodelação associada a lesão. Como um sinal da MEC, a F-spondina também é estudada por seus papéis em processos vasculares e fibróticos, nos quais a sinalização da matriz e a motilidade celular são centrais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO F-Spondin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SPON1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SPON1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SPON1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína F-Spondin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SPON1 para a investigação da sinalização de F-Spondin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SPON1 críticos para a função F-Spondin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SPON1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo F-Spondin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo F-Spondin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SPON1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo F-Spondin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR F-Spondin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SPON1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SPON1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.