Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Evx-1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-420249
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Evx-1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Evx-1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Evx-1 Antibody (397.3): sc-81962
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Evx-1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-420249 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Evx1 codifica il fattore di trascrizione homeobox Evx-1, un regolatore dello sviluppo che modella l’embrione e contribuisce a determinare le decisioni di destino cellulare lungo l’asse antero-posteriore. Nel topo, Evx-1 partecipa a reti trascrizionali che coordinano la morfogenesi, inclusi programmi genici legati al patterning del tubo neurale, alla regionalizzazione di rombencefalo e midollo spinale e allo sviluppo dei somiti. In quanto proteina che si lega al DNA in modo sequenza-specifico, Evx-1 influenza le vie di segnalazione e di differenziamento a valle controllando stati trascrizionali ristretti a specifiche linee cellulari. L’attività disregolata dei geni homeobox, inclusi programmi EVX1 alterati, viene studiata per il suo impatto su malformazioni congenite e fenotipi di differenziamento anomalo in modelli di sviluppo.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Evx-1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Evx1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Evx1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Evx1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Evx-1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Evx1 per lo studio della segnalazione di Evx-1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Evx1 critici per la funzione di Evx-1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Evx1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Evx-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Evx-1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Evx1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Evx-1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Evx-1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Evx1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Evx1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.