EMILIN-2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406521

Descripción general

EMILIN2 codifica EMILIN-2, una glicoproteína de la matriz extracelular enriquecida en microfibrillas asociadas a fibras elásticas que contribuye a la organización de la matriz y a la señalización célula–matriz. EMILIN-2 interactúa con la adhesión mediada por integrinas y con la mecanotransducción, influyendo en la dinámica del citoesqueleto, la migración y la remodelación tisular. A través de estas señales extracelulares, EMILIN2 puede modular vías vinculadas a la inflamación y a la homeostasis vascular y estromal, incluidos procesos que configuran respuestas angiogénicas y fibróticas. La expresión desregulada de EMILIN2 y la arquitectura alterada de la matriz se han asociado con la remodelación del microambiente tumoral y con defectos de la matriz extracelular relacionados con el sistema cardiovascular, lo que respalda su relevancia en la investigación de mecanismos de enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO EMILIN-2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen EMILIN2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del EMILIN2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de EMILIN2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína EMILIN-2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en EMILIN2 para la investigación de la señalización de EMILIN-2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de EMILIN2 críticos para la función de EMILIN-2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de EMILIN2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido EMILIN-2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido EMILIN-2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus EMILIN2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR EMILIN-2 (h) y el plásmido HDR EMILIN-2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología EMILIN2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana EMILIN2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.