Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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eIF2Bδ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420143
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- eIF2Bδ El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico eIF2Bδ, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: eIF2Bδ Anticuerpo (P-6): sc-9981
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
eIF2Bδ Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420143 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Eif2b4 codifica la subunidad δ de eIF2B, el factor de intercambio de nucleótidos de guanina que recarga eIF2-GDP a eIF2-GTP y, de este modo, controla el inicio de la traducción. Al modular la disponibilidad del complejo ternario, eIF2B integra señales de nutrientes y de estrés dentro de la respuesta integrada al estrés, e interactúa con la regulación de la síntesis proteica dependiente de la fosforilación de eIF2α. La actividad de eIF2B influye en la proteostasis, el crecimiento celular y programas transcripcionales adaptativos vinculados al estrés del RE y al estrés oxidativo. La disfunción de las subunidades de eIF2B se asocia con vías de leucodistrofia hipomielinizante, lo que convierte a Eif2b4 en un nodo relevante para estudiar el control de la traducción sensible al estrés en sistemas neuronales y gliales.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO eIF2Bδ (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Eif2b4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Eif2b4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Eif2b4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína eIF2Bδ.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Eif2b4 para la investigación de la señalización de eIF2Bδ, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Eif2b4 críticos para la función de eIF2Bδ
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Eif2b4 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido eIF2Bδ CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido eIF2Bδ CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Eif2b4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR eIF2Bδ (m) y el plásmido HDR eIF2Bδ (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Eif2b4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Eif2b4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.