Dermatopontin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402924

Descripción general

DPT codifica la dermatopontina, una proteína de la matriz extracelular rica en tirosina que se une al colágeno y modula la organización de la matriz, la adhesión celular y la señalización célula–matriz. La dermatopontina influye en el ensamblaje y la remodelación de la matriz extracelular al afectar la fibrilogénesis del colágeno y al interactuar con vías reguladas por factores de crecimiento, incluidas respuestas asociadas a TGF-β que determinan la actividad de los fibroblastos. La alteración de la expresión de DPT se ha relacionado con la remodelación fibrótica, la dinámica de la cicatrización de heridas y cambios estromales observados en múltiples contextos patológicos. Como componente estromal de la MEC, la dermatopontina también es relevante para estudiar cómo las señales del microambiente regulan la migración celular, la mecanotransducción y la arquitectura tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Dermatopontin (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen DPT en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del DPT junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de DPT tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Dermatopontin.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en DPT para la investigación de la señalización de Dermatopontin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de DPT críticos para la función de Dermatopontin
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de DPT para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Dermatopontin CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Dermatopontin CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus DPT. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Dermatopontin (h) y el plásmido HDR Dermatopontin (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología DPT para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana DPT definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.