Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
cyclin D1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400047
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cyclin D1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico cyclin D1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:cyclin D1 Anticorpo (A-12): sc-8396
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cyclin D1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400047 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CCND1 codifica a ciclina D1, um regulador central da transição do ciclo celular de G1/S que ativa CDK4/6 para fosforilar proteínas da família RB e promover a transcrição dependente de E2F. A ciclina D1 integra sinais mitogênicos e nutricionais a jusante de vias como RTK–RAS–MAPK e PI3K–AKT, coordenando a proliferação com o controle de crescimento e a integridade dos checkpoints. A expressão desregulada de CCND1 ou o ganho no número de cópias é frequentemente associado à entrada aberrante no ciclo celular e à instabilidade genômica, tornando-o uma característica molecular comum estudada na tumorigenese e em redes de sinalização oncogênica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO cyclin D1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CCND1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CCND1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CCND1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína cyclin D1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CCND1 para a investigação da sinalização de cyclin D1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CCND1 críticos para a função cyclin D1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CCND1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo cyclin D1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo cyclin D1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CCND1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo cyclin D1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR cyclin D1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CCND1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CCND1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.