CEACAM1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-417666

Übersicht

CEACAM1 (carcinoembryonales Antigen‑bezogenes Zelladhäsionsmolekül 1) ist ein Zelloberflächen‑Glykoprotein der Immunglobulin‑Superfamilie, das homophile und heterophile Adhäsion an epithelialen und endothelialen Grenzflächen vermittelt. Über seine zytoplasmatischen ITIM‑Motive moduliert CEACAM1 phosphataseabhängige Signalwege und beeinflusst dadurch den Output der MAPK‑ und PI3K/AKT‑Signalwege, die Organisation des Zytoskeletts sowie die Integrität von Zellkontakten. Zudem fungiert es als immunregulatorischer Rezeptor auf Leukozyten und prägt Aktivierungsschwellen und Zytokinantworten in entzündlichen Mikroumgebungen. Eine dysregulierte CEACAM1‑Expression und ein gestörtes Isoformen‑Gleichgewicht wurden mit veränderter Barrierefunktion, Immunevasion, angiogenem Remodeling und Progressionsphänotypen in zahlreichen soliden Tumoren und entzündlichen Erkrankungen in Verbindung gebracht.

Das CEACAM1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CEACAM1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CEACAM1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CEACAM1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CEACAM1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CEACAM1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CEACAM1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CEACAM1-Exone abzielen, die für die CEACAM1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CEACAM1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CEACAM1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CEACAM1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CEACAM1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CEACAM1 HDR-Plasmid (h) und CEACAM1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CEACAM1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CEACAM1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.