CD63 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419564
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD63 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CD63, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD63 Anticorpo (MX-49.129.5): sc-5275
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD63 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419564 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cd63 codifica a CD63, uma tetraspanina enriquecida em endossomos tardios, lisossomos e vesículas extracelulares, onde organiza microdomínios enriquecidos em tetraspaninas e coordena o tráfego de proteínas de membrana. A CD63 participa da maturação endossomal, da biogênese de corpos multivesiculares, da triagem de cargas de exossomos e da regulação da renovação de receptores, influenciando processos como adesão celular, migração e sinalização de células imunes. Por meio de interações com integrinas e outras tetraspaninas, a CD63 afeta vias de transporte vesicular que moldam a apresentação de antígenos e a comunicação intercelular. A expressão ou a localização alteradas de CD63 são frequentemente usadas como leitura em biologia do câncer, inflamação e modelos de doenças infecciosas devido à sua estreita associação com a dinâmica vesicular e a sinalização no microambiente tumoral.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CD63 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cd63 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cd63, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cd63 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CD63.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cd63 para a investigação da sinalização de CD63, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cd63 críticos para a função CD63
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cd63 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CD63 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CD63 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cd63. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CD63 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CD63 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cd63 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cd63 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.