Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
CCS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402130
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CCS O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CCS, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CCS Anticorpo (H-7): sc-55561
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CCS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402130 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CCS (chaperona de cobre para a superóxido dismutase) é uma metalocaperona citosólica que entrega cobre à SOD1 e promove a sua maturação por meio de interação direta e formação de pontes dissulfeto. Ao possibilitar a atividade adequada da SOD1, a CCS sustenta as defesas antioxidantes celulares e limita o dano oxidativo decorrente da respiração mitocondrial e de outros processos redox-ativos. A função da CCS está ligada à homeostase do cobre e à sinalização redox, com efeitos a jusante em vias responsivas ao estresse que influenciam a estabilidade proteica e a viabilidade celular. A desregulação do eixo CCS–SOD1 tem sido estudada em contextos de biologia do estresse oxidativo e neurodegeneração, nos quais alterações no manuseio de metais e nas espécies reativas de oxigênio contribuem para fenótipos associados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CCS (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CCS em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CCS, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CCS na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CCS.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CCS para a investigação da sinalização de CCS, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CCS críticos para a função CCS
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CCS para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CCS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CCS Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CCS. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CCS Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CCS (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CCS para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CCS definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.