cadherin-19 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401716

Descripción general

CDH19 codifica la cadherina-19, una molécula de adhesión célula–célula dependiente de calcio que contribuye a la arquitectura tisular y a la señalización mediada por contacto. Como miembro de la familia de las cadherinas clásicas, la cadherina-19 favorece la organización de las uniones adherentes mediante interacciones con las cateninas y su conexión con el citoesqueleto de actina, influyendo en procesos como la polaridad celular, la migración y la diferenciación. Se ha descrito la expresión de CDH19 en linajes neuronales y gliales, donde la adhesión mediada por cadherinas puede moldear el patrón del desarrollo y las interacciones celulares. La expresión desregulada de cadherinas y la remodelación de las uniones se asocian con frecuencia a cambios en la capacidad invasiva y en la identidad de linaje en contextos patológicos, lo que convierte a CDH19 en una diana útil para estudiar fenotipos dependientes de la adhesión.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO cadherin-19 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CDH19 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CDH19 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CDH19 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína cadherin-19.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CDH19 para la investigación de la señalización de cadherin-19, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CDH19 críticos para la función de cadherin-19
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CDH19 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido cadherin-19 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido cadherin-19 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CDH19. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR cadherin-19 (h) y el plásmido HDR cadherin-19 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CDH19 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CDH19 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.