BRDG1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425307

Descripción general

STAP1 (BRDG1) es una proteína adaptadora expresada en linajes de células hematopoyéticas e inmunitarias que coordina la señalización intracelular aguas abajo de los receptores de superficie. En modelos murinos, BRDG1 se ha relacionado con vías asociadas al receptor de células B y con la señalización dependiente de tirosina quinasas, influyendo en cascadas de fosforilación y en resultados transcripcionales que moldean la activación y la diferenciación inmunitarias. Mediante interacciones mediadas por dominios modulares de unión, BRDG1 puede afectar la integración de señales, el ensamblaje de complejos proteicos y los programas de expresión génica aguas abajo. La desregulación de las redes de señalización impulsadas por proteínas adaptadoras es relevante para fenotipos inflamatorios y mecanismos de enfermedades hematológicas, lo que convierte a Stap1 en un objetivo útil para estudiar la robustez de la señalización inmunitaria y la reconfiguración de vías.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO BRDG1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Stap1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Stap1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Stap1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína BRDG1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Stap1 para la investigación de la señalización de BRDG1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Stap1 críticos para la función de BRDG1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Stap1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido BRDG1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido BRDG1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Stap1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR BRDG1 (m) y el plásmido HDR BRDG1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Stap1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Stap1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.