ATE1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405539

개요

ATE1은 아르기닐트랜스퍼레이스 1(arginyltransferase 1)을 암호화하며, 단백질 N-말단에 번역 후(post-translational) 아르기닌을 부가해 유비퀴틴 의존적 프로테아좀 분해로 기질을 유도하는 디그론(degron)을 형성하는 N-end rule 경로의 핵심 효소입니다. 단백질 안정성 조절을 통해 ATE1은 단백질 항상성(proteostasis), 세포골격 조직화, 스트레스 반응성 신호전달에 영향을 미치며, 액틴 연관 단백질의 조절을 통해 세포 이동과 부착의 조절과도 연관되어 있는 것으로 보고되었습니다. ATE1 의존적 아르기닐화(arginylation)는 특정 조절 인자들의 양을 조정함으로써 미토콘드리아 및 산화 스트레스에 대한 적응에도 기여합니다. ATE1을 포함한 N-end rule 구성 요소의 기능 이상은 실험 시스템에서 암 생물학, 신경퇴행, 발달 관련 표현형과 연관된 세포 항상성 변화와 연결되어 있습니다.

ATE1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ATE1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ATE1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ATE1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ATE1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ATE1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ATE1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ATE1 기능에 중요한 ATE1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ATE1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ATE1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ATE1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ATE1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ATE1 HDR 플라스미드 (h) 및 ATE1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ATE1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ATE1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.